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致病菌檢測(cè)技術(shù)哪個(gè)強(qiáng)?
發(fā)布時(shí)間:2021-06-08編輯:
能夠針對(duì)食源性致病菌進(jìn)行相對(duì)準(zhǔn)確的檢測(cè),是有效控制食源性疾病發(fā)生的關(guān)鍵性的環(huán)節(jié),現(xiàn)在傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)存在很多的問題,比如說耗時(shí)長、效率低,所以更加快速和靈敏的新型的檢驗(yàn)技術(shù)已經(jīng)成為現(xiàn)在研究的熱點(diǎn)問題,利用免疫學(xué)以及分子生物學(xué)等快速、有效檢測(cè)食源性致病菌的方法進(jìn)行分析,咱們一起看看各種最新型的致病菌檢測(cè)技術(shù)的研究現(xiàn)狀和問題。 


這些年以來,我們面對(duì)的食品安全問題已經(jīng)得到了所有人的關(guān)注。隨著人們生活水平不斷提高,食源性疾病也是逐漸增多,食源性疾病更多的是由食源性致病菌引發(fā)的。食物中毒案件和人數(shù)在逐漸增加,而且大部分食物中毒是因?yàn)槭吃葱灾虏【鸬摹8鶕?jù)統(tǒng)計(jì),全世界每年患食源性疾病的患者中,70%是由致病性微生物所引起的。所以現(xiàn)階段對(duì)于我們來說,構(gòu)建起有效的測(cè)試致病菌整體的檢驗(yàn)體系,并且完成快速的致病菌檢測(cè),已經(jīng)成為防止整個(gè)疾病傳染以及食品中的安全問題的重要手段。


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一、免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)

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免疫學(xué)方法,基本上利用的是抗原-抗體發(fā)生的化學(xué)反應(yīng),也就是抗原與抗體對(duì)應(yīng)以后發(fā)生結(jié)合。運(yùn)用免疫技術(shù)的檢測(cè)方法,把目標(biāo)致病菌的表面抗原,或者說他們分泌的一些毒素之類的東西作為主要的檢測(cè)點(diǎn)。因此它是一種可以利用到我們檢測(cè)致病菌的方法。這種方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于我們平常食品中的致病菌的檢測(cè)。


比如在酶聯(lián)免疫吸附這項(xiàng)技術(shù)中,它對(duì)多種致病菌的靈敏度(敏感程度)以及特異性(特異性能)都比較強(qiáng),但是對(duì)和底物結(jié)構(gòu)相似的化合物有一些錯(cuò)雜的錯(cuò)誤匹配反應(yīng),很難同時(shí)分析很多種成分。還有在分離技術(shù)當(dāng)中,可以很大程度地提高食物樣品中某些特定病原菌的檢出率,如副溶血性弧菌的檢測(cè)。但是它的價(jià)格相對(duì)其他方法來說是比較昂貴的,并且也是容易出現(xiàn)一些交叉錯(cuò)誤的反應(yīng)的,所以還需要通過其他的技術(shù)來進(jìn)行輔助。


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二、代謝學(xué)檢測(cè)技術(shù)

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代謝學(xué)檢測(cè)技術(shù)就是在微生物生長代謝的基礎(chǔ)上,能夠通過對(duì)微生物的生長過程中含有的一些底層物質(zhì),以及代謝之后產(chǎn)生物質(zhì)的變化,結(jié)合我們能夠看到的、了解的一些特點(diǎn)來進(jìn)行一系列的監(jiān)控,從而達(dá)到我們檢驗(yàn)微生物的一個(gè)最終目的。代謝型技術(shù)是有非常大的應(yīng)用潛力的。尤其是在一些全球性出現(xiàn)的食品安全問題當(dāng)中,可以作為非常有效的檢測(cè)工具。


就比如說電阻抗技術(shù)就是他其中的一個(gè)例子。通過檢測(cè)我們培養(yǎng)基電阻抗的一些變化,從而從這些方面來判斷細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)基當(dāng)中繁殖方面的情況,再通過數(shù)據(jù)庫的比對(duì)得到最終結(jié)果。目前他這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于我們食品當(dāng)中的類似于金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌等致病菌的檢測(cè)技術(shù)中去。  


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三、分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)

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隨著條件的發(fā)展,分子生物學(xué)這門學(xué)科得到非常快速的發(fā)展,它針對(duì)食源性致病菌的一些定性檢測(cè)以及鑒別已經(jīng)不僅僅局限于菌落外部形態(tài)特征,以及一些明顯的生化反應(yīng)特點(diǎn)的檢測(cè)上,而是從整個(gè)分子層面的水平上研究生物中的大分子,在這個(gè)基礎(chǔ)上我們建立起來了很多的分子生物檢測(cè)技術(shù)。

  比如說我們常常聽說的脫氧核糖核苷酸的探針技術(shù)即核酸探針技術(shù),其核心原理是堿基配對(duì)。核酸探針其實(shí)指的是帶有標(biāo)記物的已知序列的核酸片段,它能和與其互補(bǔ)的堿基配對(duì),形式雙鏈。以此可用于檢測(cè)樣品中的特定基因序列。利用核酸探針技術(shù)去獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果要比常規(guī)的檢測(cè)方法要更加快速并且有更高的準(zhǔn)確性,但是這項(xiàng)技術(shù)目前也有很多的局限性,它的后續(xù)處理會(huì)有挺多的比較大的困難。所以我們需要更加完善它。可以用的完整的探針,放大它的信號(hào)組合,延長或者研究出其它的雜交方式等等辦法,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)我們的研究對(duì)象來進(jìn)行更加敏感的、高效率的、快速的檢測(cè)。


在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的這樣一個(gè)技術(shù)當(dāng)中,它也是需要生物體之外的合適友好的條件下進(jìn)行的。我們常見的利用它來檢測(cè)食源性致病菌的技術(shù)其實(shí)有很多,因?yàn)橄鄬?duì)于傳統(tǒng)的常見的一些檢測(cè)辦法,它的檢測(cè)技術(shù)可以大大減少我們整個(gè)檢測(cè)周期所需要的時(shí)間,而且相對(duì)來說它的操作更加簡單方便,并且它的特異性以及靈敏性更強(qiáng)。但是這項(xiàng)技術(shù)在我們食品微生物檢測(cè)行業(yè)當(dāng)中并沒有得到很多的應(yīng)用,很重要的原因就是因?yàn)樵诓煌胤竭M(jìn)行測(cè)驗(yàn)產(chǎn)生的結(jié)果可能會(huì)有不同,所以它的準(zhǔn)確性沒有很大的保障。 


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四、生物傳感器檢測(cè)技術(shù)

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生物傳感器是利用對(duì)生物中一些物質(zhì)敏感,以及把它的濃度轉(zhuǎn)化為一個(gè)電信號(hào)來進(jìn)行檢測(cè)的一個(gè)儀器,它的工作原理就是把我們等待檢測(cè)的物質(zhì)擴(kuò)散到一個(gè)固定化的生物敏感材料當(dāng)中,讓它發(fā)生特定的反應(yīng),它能產(chǎn)生的信息被適當(dāng)?shù)剞D(zhuǎn)化成電信號(hào),在經(jīng)過一些放大來進(jìn)行輸出。一個(gè)生物芯片可以反復(fù)使用超過1000次。生物傳感器的穩(wěn)定性非常好,選擇性很強(qiáng),靈敏度很高,成本又比較低,這一系列優(yōu)點(diǎn)能讓這個(gè)檢測(cè)技術(shù)在復(fù)雜的體系中進(jìn)行連續(xù)而快速的檢測(cè)。


電化學(xué)生物感應(yīng)器是生物傳感器檢測(cè)技術(shù)中的一個(gè)部分,它可以通過檢測(cè)修飾一些電極在待檢測(cè)的溶液當(dāng)中化學(xué)信號(hào)的變化,確定整個(gè)溶液中DNA的濃度。在進(jìn)行生物體基因互補(bǔ)堿基對(duì)的時(shí)候,我們就可以非常輕易應(yīng)用生物傳感器檢測(cè)致病菌,檢測(cè)的極限可以達(dá)到2.0×106CFU/mL。但是,電化學(xué)DNA傳感器還存在一定的局限性,就比如說很難以在表面構(gòu)建成復(fù)雜的機(jī)制環(huán)境,它的整個(gè)空間結(jié)構(gòu)存在變化。  


光學(xué)生物傳感器來源于傳統(tǒng)的一些物理傳感器,它對(duì)抗外界干擾的能力相對(duì)較強(qiáng),它把已知的一些生物分子固化在幾十納米厚的金屬膜表面,隨機(jī)被表面的等離子共振傳感器轉(zhuǎn)化,接下來就進(jìn)行檢測(cè)分析,有人把大腸埃希氏菌抗體固定到傳感器芯片的表面,并且對(duì)這些進(jìn)行了雙抗體夾心的一系列的操作,它的檢測(cè)極限已經(jīng)達(dá)到了103CFU/mL。


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五、噬菌體識(shí)別檢測(cè)技術(shù)

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噬菌體識(shí)別檢測(cè)技術(shù)在致病菌檢測(cè)方面成為整個(gè)開發(fā)的研究熱點(diǎn)問題,噬菌體是一種可以侵入細(xì)菌并住宿在宿主體內(nèi)進(jìn)行增殖的病毒。它的主要檢測(cè)方法是群體檢測(cè)方法,有基于分子生物學(xué)構(gòu)建的報(bào)告噬菌體檢測(cè)技術(shù),另外還有輔以先進(jìn)的生物或者是化學(xué)試劑來進(jìn)行檢測(cè)的辦法,比如說熒光標(biāo)記法等等。


在這當(dāng)中噬菌體擴(kuò)增法應(yīng)用免疫磁性分離式卷體擴(kuò)增法。檢出限達(dá)到了10000CFU/mL。但是這個(gè)方法的缺點(diǎn)是檢測(cè)需要用很多的條件來進(jìn)行選擇,它的濃度和感染時(shí)間等等這些必須要事先進(jìn)行篩選。  


另外還有報(bào)告噬菌體技術(shù),他們構(gòu)建的含有l(wèi)ux基因的報(bào)告是群體用于檢測(cè)一些不同樣品基質(zhì)中的大腸桿菌O157:H7,雖然檢測(cè)的時(shí)間不是很相同,但是檢出限都可以達(dá)到1CFU/mL。在熒光標(biāo)記的噬菌體技術(shù)當(dāng)中,它們?nèi)〉昧艘恍┍容^好的效果。有人報(bào)道了利用免疫磁性分離,結(jié)合熒光標(biāo)記噬菌體技術(shù),用于檢測(cè)碎牛肉和鮮奶中的大腸埃希氏菌,碎牛肉的大腸埃希氏出限達(dá)到了2.2CFU/g,鮮奶中的大腸埃希氏菌檢出限達(dá)到了10CUF/mL~100CUF/mL。


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結(jié)束語

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食品安全問題關(guān)系到我們的國計(jì)民生,隨著整個(gè)經(jīng)濟(jì)社會(huì)的不斷發(fā)展。我們一定會(huì)探究出更加優(yōu)秀的辦法來進(jìn)行更加完善的檢測(cè),隨著人們對(duì)微生物的認(rèn)識(shí)逐漸的深入與透徹,相信一定會(huì)有更多的分析辦法和檢測(cè)技術(shù)能夠應(yīng)用到我們的生活當(dāng)中。

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