當(dāng)前所在頁面：一、方法原理
在pH＜2 的條件下，樣品中的油類物質(zhì)被正己烷萃取，萃取液經(jīng)無水硫酸鈉脫水，再經(jīng)過硅酸鎂吸附除去動植物油等極性物質(zhì)后，于225nm波長處測定吸光度，石油類含量與吸光度值合朗伯-比爾定律。
二、前處理步驟
將水樣全部轉(zhuǎn)移至1000mL分液漏斗中，量取25.0mL正己烷洗滌采樣瓶后，全部轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，充分振搖2min，期間經(jīng)常開啟旋塞排氣，靜置分層30min后，將上層的有機(jī)相進(jìn)行脫水。
（1）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：將上層有機(jī)相萃取液轉(zhuǎn)移至已加入3 g無水硫酸鈉的錐形瓶中，蓋緊瓶塞，振搖數(shù)次，靜置。若無水硫酸鈉全部結(jié)塊，需補(bǔ)加無水硫酸鈉直至不再結(jié)塊。
（2）方法改進(jìn)：將玻璃漏斗中加入一定量的無水硫酸鈉，取10mL左右的正己烷過濾并棄去。隨后下方連接 25mL容量瓶，將上層有機(jī)相萃取液注入并利用重力的影響實(shí)現(xiàn)脫水的效果，再取一定數(shù)量的正己烷洗滌玻璃漏斗，最后定容至25mL容量瓶。
（1）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：繼續(xù)向萃取液中加入3g硅酸鎂，置于振蕩器上，以180~220r/min 的速度震蕩20min，靜置沉淀。在玻璃漏斗底部墊上少量玻璃棉，過濾，待測。
（2）方法改進(jìn)：將玻璃層析柱中加入約5cm左右的硅酸鎂，將定容后的倒入吸附，棄去一定的前導(dǎo)液后，將脫水改進(jìn)后定容至25mL容量瓶中的正己烷溶液倒入玻璃層析柱中，同樣利用重力的影響實(shí)現(xiàn)吸附的效果。（過柱子）改進(jìn)后實(shí)驗(yàn)省略了振蕩器的使用，并相對減少了因?yàn)檎袷幤魉a(chǎn)生的大部分時間，而吸附的效果并未受到影響。
萃取注意事項(xiàng)：
（1）標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定萃取時人工振搖的方向、頻率、幅度等參數(shù)，建議通過規(guī)范振搖細(xì)節(jié)以減少人員操作手法不同造成的誤差。
例如: 在人工振搖前先檢查瓶塞是否塞緊、放水閥是否已閉合；將分液漏斗橫置后雙手持緊，以肘關(guān)節(jié)為支點(diǎn)做上下方向振搖，頻率至少120次/min，為避免漏液不建議左右振搖；振搖1min后放氣1次，再振搖1min后，靜置。
（2）萃取液出現(xiàn)乳化現(xiàn)象時，可滴加3～4滴無水乙醇破乳。
三、控制因素分析
紫外法采用正己烷作為樣品萃取溶劑，標(biāo)準(zhǔn)中沒有直接規(guī)定正己烷的純度，而是對溶劑的透光率做了要求，所以不論使用的何種純度的正己烷，分析樣品前均需要對使用的正己烷做透光率檢驗(yàn)。
溶劑正己烷的檢驗(yàn)是水質(zhì)石油類檢測的第一步和保證，新標(biāo)準(zhǔn)中對對正己烷透光率的檢驗(yàn)和脫芳處理做出了要求：
使用前于波長225nm處，以水做參比測定透光率，透光率大于90%方可使用，否則需脫芳處理。脫芳處理方法：將500ml正己烷加入1000ml分液漏斗中，加入25 ml硫酸萃洗10min，棄去硫酸相重復(fù)上述操作，直至硫酸相近無色，再用蒸餾水萃洗3次，至透光率大于90%即可。
標(biāo)準(zhǔn)中的要求有兩項(xiàng)直接影響正己烷透光率的指標(biāo)未作出規(guī)定，即：測定透光率所使用的參比溶液水的級別；測定溶劑透光率使用的比色皿規(guī)格。
姑且認(rèn)為實(shí)驗(yàn)室用水均為超純水，楊陽等人報(bào)道過：以實(shí)驗(yàn)室超純水為參比，
采用1cm石英比色皿，市面上購買大部分色譜純級正己烷均可直接達(dá)到90%透光率要求，無需進(jìn)行脫芳處理，而優(yōu)級純和分析純正己烷則需要進(jìn)行脫芳處理；
采用2cm石英比色皿，市面上購買的多種常用色譜純級正己烷都無法直接達(dá)到90%透光率要求，均需要進(jìn)行脫芳處理。
所以標(biāo)準(zhǔn)中需要進(jìn)一步明確透光率測定所使用的比色皿規(guī)格。
說一個實(shí)驗(yàn)室小伙伴的親身經(jīng)歷，我們一般都是先對試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，看試劑是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求，要是試劑不合格，后面做了也白搭。當(dāng)然HJ970-2018也不例外。HJ970-2018里面明確規(guī)定，用純水作參比，在225nm處，透光率T要大于90%，方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，否則需要進(jìn)行脫芳處理。
剛好，他們有三種不同品牌（默克、天地、安譜）的色譜純正己烷，按照標(biāo)準(zhǔn)要求，用2cm比色皿對正己烷進(jìn)行檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)T%都是在80%左右。這就有點(diǎn)奇怪了，標(biāo)準(zhǔn)編制說明里面清清楚楚寫的這三種品牌T%是大于90%。當(dāng)時甚是不解，他們一邊著手進(jìn)行脫芳處理，一邊用1cm比色皿進(jìn)行T%檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)T%均大于90，和編制說明里面提供的透光率相差無幾。這時，他再去看看脫芳處理，硫酸相依然是無色，并沒有標(biāo)準(zhǔn)里面描述的情況發(fā)生。他仔細(xì)思考著，難道是我們正己烷質(zhì)量問題？但是也沒有道理三個品牌的質(zhì)量都有問題。于是，他趕緊咨詢一下兄弟站，都喊T%達(dá)不到要求。
猶豫了一會，他撥通了標(biāo)準(zhǔn)編制單位的電話，向?qū)Ψ秸f了自己遇到的問題，并仔細(xì)問了一下檢驗(yàn)T%到底是用1cm還是2cm的比色皿？對方很熱情和耐心回答他的疑惑，并表示下午給他回電話。下午快下班的時候，他收到電話說去核實(shí)了，在檢驗(yàn)T%的過程用的是1cm的比色皿。到此，正己烷T%的檢驗(yàn)就此告一段落。
標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定：將樣品全部轉(zhuǎn)移至1000ml分液漏斗中，量取25.0ml正己烷洗滌采樣瓶后，全部轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。充分振搖2 min，期間經(jīng)常開啟旋塞排氣，靜置分層后，將下層水相全部轉(zhuǎn)移至1000ml量筒中，測量樣品體積并記錄。
緊隨其后，標(biāo)準(zhǔn)中給了注：注 2：可采用自動萃取裝置代替手動萃取。
由于不同的自動萃取方式在不同的萃取條件下，即便是手動萃取，振蕩次數(shù)的改變都會引起結(jié)果的偏差，不同萃取方式的萃取效率會存在很大的差異，因此測定結(jié)果會因?yàn)檩腿》绞降牟煌淖�，從而�?yán)重影響到測定值的準(zhǔn)確性。
如果要保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性、滿足質(zhì)量控制的要求，一定要統(tǒng)一自動萃取條件，如果是手工振蕩，應(yīng)確定振蕩次數(shù)，而不僅僅是時間；如果是自動萃取裝置應(yīng)確定萃取時間和泵速。
新標(biāo)準(zhǔn)中將萃取液采用加入無水硫酸鈉振搖脫水，同時注明也可采用將萃取液過10mm無水硫酸鈉的玻璃漏斗脫水。
將上層萃取液轉(zhuǎn)移至已加入3g無水硫酸鈉的錐形瓶中，蓋緊瓶塞，振搖數(shù)次，靜置。若無水硫酸鈉全部結(jié)塊，需補(bǔ)加無水硫酸鈉直至不再結(jié)塊。注：也可將萃取液通過已放置約10mm厚度無水硫酸鈉的玻璃漏斗脫水。
對于脫水方式，標(biāo)準(zhǔn)中也是給出了兩種選擇，同樣為測定帶來了不確定性和方法上的偏差。
通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對于水體污染較重的水樣在萃取過程中極易產(chǎn)生乳化現(xiàn)象，此時如采用過10 mm無水硫酸鈉玻璃漏斗脫水時，脫水并不完全，會導(dǎo)致測量值偏高。而采用振搖脫水方式，由于中途可以補(bǔ)加無水硫酸鈉，脫水比較完全。
建議遇萃取出現(xiàn)乳化現(xiàn)象的水樣時，如要采用過10 mm無水硫酸鈉玻璃漏斗脫水應(yīng)適當(dāng)增加無水硫酸鈉厚度，以保證脫水完全，如果乳化程度較重，應(yīng)破乳后再脫水。
可能是新標(biāo)準(zhǔn)的不確定性較大或者前期實(shí)驗(yàn)不足，吸附方式同樣給出了2種選擇，采用硅酸鎂對萃取樣品進(jìn)行吸附處理時可采用振搖和過層析柱：繼續(xù)向萃取液中加入3 g硅酸鎂，置于振蕩器上，以180 r/min~220r/min 的速度振蕩20 min，靜置沉淀。在玻璃漏斗底部墊上少量玻璃棉，過濾，待測。注：也可采用硅酸鎂吸附柱進(jìn)行吸附。將萃取液通過硅酸鎂吸附柱， 棄去前2 ml~3 ml 濾液，待測。
值得慶幸的是2種方法均有較好的效果，但是振搖方式過于費(fèi)時，為提高樣品處理效率，建議采用過層析柱（硅酸鎂易受污染，高溫處理后的硅酸鎂在裝柱使用前可用正己烷淋洗2遍），同時還可以用柱狀砂芯漏斗代替層析柱，提高過濾速度。
這里同樣給出一個注：層析柱是色譜分析的一種形式，所以柱的填裝很重要，裝滿裝實(shí)敲打。
采用紫外法對實(shí)際樣品進(jìn)行檢測時，水樣石油類測量值與紅外法測量值相比并不一致，從原理上進(jìn)行分析，主要原因：
（1）由于紫外法測定水體中石油類時主要測定是，含有共軛雙鍵的非飽和烴類物質(zhì)；而紅外法是測定飽和烴類物質(zhì)；實(shí)際水體中石油類成分組成不同，所以測量時與紅外法相比測量結(jié)果會存在差別。
（2）實(shí)際水體中還含有的能被正己烷萃取的胺類、有機(jī)酸類、醚類、酮類等有機(jī)物在波長為225 nm 范圍也存在吸收，可能會導(dǎo)致測量結(jié)果正偏離。
所以采用紫外法測得的石油類含量并不能充分代表實(shí)際水樣中石油類的總體含量，在應(yīng)用過程中有一定的局限性。
四、注意事項(xiàng)
1、測定吸光度時應(yīng)用正己烷和萃取液分別漂洗比色皿，對已知濃度的萃取液應(yīng)遵循從低濃度到高濃度的順序進(jìn)行比色，避免污染。
2、當(dāng)樣品濃度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍時，建議將萃取液稀釋至濃度≤0.5mg/L(樣品濃度)測定，能明顯提高測定準(zhǔn)確度。
3、規(guī)避器皿影響因素：
（1）材質(zhì)選擇：分液漏斗內(nèi)壁應(yīng)光滑不易黏附雜質(zhì)，應(yīng)選擇玻璃蓋和聚四氟乙烯旋塞，旋塞上的橡膠圈會釋放污染物，應(yīng)棄去不用；比色皿應(yīng)選擇石英材質(zhì)(玻璃比色皿無法測定)。
（2）清洗：應(yīng)將器皿用洗滌劑洗凈，再用自來水和純水沖凈并烘干，分液漏斗旋塞間隙極易殘留雜質(zhì)，尤其應(yīng)將旋塞拆開徹底清洗。
（3）漂洗：應(yīng)用少量正己烷對清洗后的器皿進(jìn)行漂洗，可通過測定正己烷漂洗液的吸光度來控制漂洗質(zhì)量。
（4）器皿獨(dú)用：由于紅外法測定時所使用的四氯乙烯和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)會對紫外法測定產(chǎn)生很大干擾，因此切不可將紅外法與紫外法測定所用的器皿混用。
（5）其他方面：容量瓶、旋塞、瓶蓋等均不能使用皮筋栓扎，避免被溶劑溶解后混入樣品；測定過程中，瓶塞、瓶蓋、移液管、漏斗等不應(yīng)放置在濾紙、塑料容器和塑料架子上，可放置在洗凈的玻璃燒杯和培養(yǎng)皿中。
