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實驗一線操作，微生物檢測過程中的問題及解答集錦！
發布時間：2019-12-25編輯：
1.微生物實驗過程中使用的移液槍怎么滅菌？答：移液槍用紗布包好，外面報紙包好滅菌。不能濕熱滅菌的槍，在槍口處塞入少許棉花，外面采用表面滅菌的方法擦拭滅菌，里面采用熱空氣交換法或者潔凈空氣交換法處理。2.微生物實驗過程中如果移液槍槍頭想要重復使用怎么辦？答：槍頭盒裝好，報紙包好滅菌。槍頭少的話放入平皿或者小燒杯后，報紙包好滅菌。答：移液管、平皿之類的工器具沒打開放無菌室一般可以放置兩個星期左右。滅菌后的培養基放冰箱冷藏保存通常可放一星期。5.GB4789.10-2016金黃色葡萄球菌檢驗中培養時間很多都改成了24-48h ，這個跨度有點大，具體怎么判定��？答：如果培養24h后已經長菌就不需要再進行培養了；如果培養24h后未長菌則需要繼續培養至48h。答：①被檢人員雙手五指并攏，用浸濕生理鹽水的脫脂棉在手指曲面，從指尖、指溝處到指端來回涂抹2次（一只手涂抹面積約30平方厘米）。
②將脫脂棉放到10ml滅菌生理鹽水采樣管內，蓋緊試管，詳細標記取樣點和取樣時間。
③將取好的樣品送到檢測，由檢測員將每只樣試管振打80次或用混勻器充分混勻，取1ml樣液，放入滅菌平皿內，傾注營養瓊脂，每個樣品平行接種兩塊平皿，同時接種一個空白樣，在平皿上詳細標記取樣點和取樣時間。
④將采樣后的平皿在35-37℃條件下培養48±2小時后取出查看結果，計數平板上的細菌菌落數；（將采樣后的平皿在27-29℃條件下培養5-7天后取出查看結果，計數平板上的霉菌菌落數）。7.培養皿上用記號筆寫的字，用酒精擦完還有殘留的顏色咋辦？ 答：有二個辦法：一，棉球做成小球球（和醫生擦的那種大小）然后泡酒精里，用時候少量多次。這樣殘痕少。第二個辦法：買點去污粉，先統一找塊抹布蘸去污粉把字先擦拭掉，然后再去統一擦拭去污粉，然后清水洗凈。8.微生物一般默認是不用做回收率，感覺是約定俗成的了，但是為什么呢？有時候會有做化學的朋友問我，但是又沒有一個特別好的解釋。大家有沒有很權威的或者理論支持很強的理由呢？答：應該是因為微生物分布的不均勻性吧，另外微生物會生長繁殖，也是重要的影響因素��；食品行業沒有強制要求而已；制藥行業微生物檢驗方法驗證是要求做回收率的，詳見《中國藥典》2015年版四部通則與《中國藥品檢驗標準操作規范》2010年版中“微生物限度檢查”有關內容。9.內審時，專家提出高壓滅菌器的滅菌時間沒有校準，可是，當地的省計量院計量高壓滅菌器時依據的標準只需要對溫度和壓力進行校準，沒有時間項目，這個該如何整改？ 答：這里提供一個可行性方案：增加秒表，操作員進行秒表與滅菌器進行校準書寫記錄，每年對秒表進行校準。10.一般在超凈工作臺里開紫外燈，然后把玻璃門關下。如果不能穿透玻璃，是不是在超凈工作臺外還要在開一個紫外燈滅菌��？
答：紫外線是不能穿透玻璃的，因為紫外線波長短，能量不高，穿透能力比較弱，只能做表面的殺菌，且作用有效距離只有1.5米；紫外線是不能穿透玻璃的，超凈工作臺外還要在開一個紫外燈滅菌。11.車間生產一鍋洗潔精（菌落總數檢驗方法按GB4789.2），生產完（產品中添加防腐劑）立即取樣檢驗菌落總數結果是300cfu/g,隔一天后重新取樣菌落總數是＜10CFU/g，取樣時間不同結果差距這么大，是因為防腐劑將菌落抑制殺死了嗎，還是檢驗操作出現問題了？有時候感覺微生物檢驗不確定因素太多了，比如同一個罐里同時取的原料（兩個平行樣），同時檢驗得出的結果差距很大，一個有檢出一個沒檢出菌落，都不知道到底有沒有被污染？
答：微生物不同其他的項目，比如一些理化指標，只要攪拌均勻了，數據的分布也是很均勻的，不會因取樣的位置變化而發生大的變化，但微生物就不一樣了，本來產品里面存在就少，還分布不均勻，而且樣品還經過了稀釋，所以加入到培養基里面的試液是否含菌就很難說。
比如即使你取的樣品里面取到了含菌的部分，但最后做實驗的時候卻只是抽樣的一小部分，并且又經過生理鹽水的稀釋，然后再從這個稀釋液里面取1ml去培養，那這1ml里面能抽到菌體的可能性是多大呢？如果剛好抽到一個，那培養之后就是一個菌落。防腐劑一般不殺菌。只有抑菌作用。12.無菌室有霉菌了，怎么除掉��？采用施特白熏蒸后還是有霉菌，怎么辦�。�答：一般選擇進行熏蒸和除濕，采用施特白季銨鹽還沒有氯有效，建議采用過氧乙酸熏蒸，并在熏蒸時把無菌室風機關上，熏蒸完，靜置30分鐘再打開風機排棄。13.審核老師提出高壓蒸汽滅菌鍋需要考壓力容器作業證去哪報名？答：市場監管局或質量技術監督局的特種設備管理科室。答：一般一段奶粉都需要，為保證其質量，與其相關原輔料，包材以及與奶粉接觸的均需要，當然包括奶粉量勺。依據GB10765-2010。15.食品大腸菌群檢測，依照現在的國標用什么培養基檢測�。啃枰M行復發酵實驗嗎？答：MPN法所用培養基為：初發酵為LST,復發酵是BGLB。平板計數法所用培養基為VRBA和BGLB。16.新版本的8538中的嚴格厭氧菌應該使用那種呢，用雙歧桿菌是否可以呢，請教各位老師們！17.有人做過GB/T18204.4-2013公共用品用具的微生物檢測嗎，國標寫“公共場所用品用具每件用品采集2份樣“，因為是物品不同部位采集兩份，那么做菌落、金葡等檢測是兩份樣品都要用檢液測平行，還是隨機抽一份樣品做菌落平行，另一份樣品做其他項目？因為公共用品用具要做菌落、大腸、金葡、溶血鏈球、真菌，如果兩份樣都做同一項目平行樣品顯然不夠用，而且工作量大，還有該檢測大腸菌群用多少檢樣導入乳糖膽鹽發酵培養基，一定要10ml檢液嗎？另外想問問公共衛生的致病菌金葡與溶血性鏈球菌的標準菌株是買什么編號，第幾代的菌做陽性對照實驗？請幫忙解答下，非常感謝！答：兩份不同部位隸屬于同一樣品，合二為一實驗處理；是的大腸菌群檢液10ml；標準菌株編號參照GB 4789.28，工作菌株采用3、4代為宜。18.菌落總數等檢測項目用的稀釋液：225ml生理鹽水，這個時候的用的“生理鹽水”算培養基嗎？如何做質量驗收？GB 4789.28《培養基和試劑的質量要求》 中也沒有提到。答：生理鹽水算自制培養基，要做配制記錄，但是驗收只做供應商和感官就好。把生理鹽水作為一種檢測用試劑，使用前填寫配制記錄、滅菌記錄，沒有質量驗收一說，也可以。19.微生物培養箱需要定期消毒嗎？若消毒，消毒頻率如何定？用哪種消毒方式？②頻率自行規定，我們要求每周，有文件規定。
③可以用濕毛巾擦定后，再用一塊干燥的軟毛巾擦干，再噴灑75%的酒精。
